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双荧光素酶报告基因检测【miRNA对靶基因调控研究】

  miRNA通过碱基互补配对的方式识别靶基因的3’UTR区，并根据互补程度的不同指导沉默复合体降解靶mRNA或者阻遏靶mRNA的翻译。因此，可以将目的基因的3’UTR区域构建到含luciferase的报告基因上，通过比较miRNA过表达或inhibitor 与报告基因作用检测荧光值的变化，判断miRNA对靶基因的作用。再通过对3’ UTR区进行定点突变的方法进一步确定miRNA与靶基因3’UTR的作用位点。miRNA对靶基因功能的调控是当前研究的热点。通过利用双荧光素酶报告基因检测实验寻找或验证miRNA对靶基因的调控作用是当前最常用的技术。

作用示意图

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