您当前的位置：首页 > 技术服务 > 免疫检测平台 > IP 和Co-IP

IP 和Co-IP

    免疫沉淀是利用抗原抗体特异性反应纯化富集目的蛋白的一种方法。抗体与细胞裂解液或表达上清中相应的蛋白结合后，再与Protein A／G或二抗偶联的agaose或Sepharose beads孵育，通过离心得到beads－protein A／G或二抗－抗体－目的蛋白复合物，沉淀经洗涤后，重悬于电泳上样缓冲液，煮沸5－10 min，在高温及还原剂的作用下，抗原与抗体解离，离心收集上清，上清中包括抗体、目的蛋白和少量的杂蛋白。 
    免疫共沉淀（Co-Immunoprecipitation，Co-IP）是以抗体和抗原之间的专一性作用为基础的用于研究蛋白质相互作用的经典方法。是确定两种蛋白质在完整细胞内生理性相互作用的有效方法。其原理是：当细胞在非变性条件下被裂解时，完整细胞内存在的许多蛋白质－蛋白质间的相互作用被保留了下来。如果用蛋白质X的抗体免疫沉淀X，那么与X在体内结合的蛋白质Y也能沉淀下来。这种方法常用于测定两种目标蛋白质是否在体内结合；也可用于确定一种特定蛋白质的新的作用搭档。

服务要求

    提供新鲜样本材料和IP及WB的一抗（或信诺金达代购）
注：免疫共沉淀(co-IP)通常必须使用未经冻存的新鲜蛋白样品。普通的免疫沉淀虽然可以使用冻存的蛋白样品，但也宜用新鲜的蛋白样品为佳。

服务基本流程

    1. 裂解样品，准备蛋白样品；
    2. 准备抗体-Protein A/G beads；
    3. 样品，抗体-Protein A/G bends共孵育；
    4. 洗脱；
    5. WB检测。 

服务报告内容

    WB胶片，PVDF膜，和实验报告。