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GST pull-down
GST pull-down是验证两个蛋白体外结合的方法之一。原理是：将靶蛋白与GST融合表达，并将蛋白固化在谷胱甘肽(GSH)亲和树脂上，作为与目的蛋白亲和的支撑物，充当“诱饵蛋白”，目的蛋白溶液过柱，可从中捕获与之相互作用的“捕获蛋白”（目的蛋白），洗脱结合物后通过WB分析，从而证实两种蛋白间的相互作用。
"诱饵蛋白"和"捕获蛋白"均可通过细胞裂解物、纯化的蛋白、表达系统以及体外转录翻译系统等方法获得。此方法简单易行，操作方便。示意图如下
服务要求
构建表达纯化靶蛋白与相关诱饵蛋白（或提供序列由信诺金达构建），或者含有诱饵蛋白的细胞裂解上清或者其它（或有信诺金达公司表达裂解）；检测用一抗（GST/His/Flag有信诺金达公司免费提供）。如果提供表达蛋白样品需-20℃冻存，冰袋运输。
服务基本流程
1.构建原核表达载体；
2.诱导蛋白表达；
3.GST pull-down；
4.SDS-PAGE 或WB检测；
5.整理实验报告。
服务报告内容
提供完整的实验报告， SDS-PAGE 或WB结果。 |
