miRNA荧光定量PCR实验技术服务
Real-time miRNA是小的非编码RNAs,通过选择性的与互补的mRNA或3' UTL序列结合控制着转录水平的基因表达。近30%哺乳动物基因受小RNA分子的调控,从而调节各种生物功能,包括发育、细胞分化、增殖、凋亡、维持stemness和impriting。Northern blot是分析各种miRNAs常用的方法,但Northern blot分析的灵敏度低、通量差仍是其主要不足。实时定量PCR由于其灵敏度高、方便快速成为检测的一个不错选择。
由于成熟的miRNA仅为21-23nt,不能通过传统方法进行发转录,进而进行定量。信诺金达采用miRNA加尾方法反转录miRNA,然后进行miRNA定量(见下图)。
miRNA荧光定量PCR服务要求
需提供新鲜或者保存完好的细胞(至少5×10的6次方)、组织(100mg)、血液(300μl)等样本材料;或纯化好的总RNA(OD260/OD280在1.9-2.1之间,完整性好);
同时提供待测miRNA序列或登录号。
miRNA荧光定量PCR服务报告内容
miRNA(或总RNA)浓度,电泳图片,扩增曲线,熔解曲线,Ct值以及 数据统计分析(可选),实验报告以及剩余引物和模板(信诺金达可保存1个月)
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