Southern Blot
Southern印迹杂交(Southern blot)是1975年由英国人southern创建,是研究DNA图谱的基本技术。Southern印迹杂交(Southern blot)是进行基因组DNA特定序列定位的通用方法。一般利用琼脂糖凝胶电泳分离经限制性内切酶消化的DNA片段,将胶上的DNA变性并在原位将单链DNA片段转移至尼龙膜或其他固相支持物上,经干烤或者紫外线照射固定,再与相对应结构的标记探针进行杂交,用放射自显影或酶反应显色,从而检测特定DNA分子的含量。信诺金达提供DIG标记的Southern Blot技术服务。
服务要求
1、待杂交目标基因序列和含有待杂交基因的阳性质粒,我们会依据Southern blot实验要求重新选择全长或部分区域作为探针序列,使用PCR法标记地高辛探针。
2、待杂交的高质量DNA样品质量至关重要,决定实验的成败,请确保DNA抽提质量,尽量采用进口试剂盒提取或委托信诺金达提取。
A、基因组DNA检测:OD260/OD280=1.8-2.0,浓度大于0.3μg/ul,杂交需模板DNA约60 μg/泳道/次;
B、请提供基因组DNA检测图片,要求无降解,无蛋白污染;
C、检测样品低温运输至公司。
3、客户如果无法提供高品质的基因组DNA样品,信诺金达可以帮助制备可用于Southern Blot检测的DNA样品,客户提供样品要求如下:
A、菌液:不低于500ul,冰袋或者干冰运输
B、组织:总量不小于2g,干冰运输
C、细胞:提供新鲜的细胞即可,尽量不要使用盐溶液冲洗
4、请注明基因组DNA酶切方案,如果项目中需要用到非常规的限制性内切酶,需额外加收酶切费用或有客户提供相应的限制性内切酶。
服务基本流程
1.基因组DNA提取(如果需要);
2.探针设计合成(如果需要);
3. DIG探针标记;
4. Southern杂交检测;
5. 提交电子版检测报告,包括详细操作程序和实验结果等。
Southern Blot服务交付文件
信诺金达负责对客户提供样品进行DIG探针标记与Southern杂交检测技术服务,最终提供检测报告及检测图片
1、DNA样品检测报告(实验样品不返还,请注意保留备份)
2、标准实验流程报告
3、southern blot实验结果检测报告
4、如果是实验有额外的要求,请提前致电或邮件说明
实验范例图片:

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