端粒检测
端粒是位于真核生物染色体末端特殊DNA序列与特定蛋白质形成的复合体,在细胞分裂过程中避免染色体的末端融合和错误降解,以维持染色体的结构完整与稳定。端粒DNA由大量简单的串联重复序列组成,由端粒酶合成,在个体的生长发育过程中会发生长度改变、重复序列改变和重排等变化。
端粒长度是反映细胞状态的一项重要指标,检测端粒长度的方法有多种,其中Southern Blot是最常用的方法,Southern Blot操作简便、成本较低,能很直观的反应端粒长度。信诺金达的Southern Blot平台能为您提供高效的端粒检测服务。
服务要求
1、待杂交目标基因序列和含有待杂交基因的阳性质粒,我们会依据Southern blot实验要求重新选择全长或部分区域作为探针序列,使用PCR法标记地高辛探针。
2、待杂交的高质量DNA样品质量至关重要,决定实验的成败,请确保DNA抽提质量,尽量采用进口试剂盒提取或委托信诺金达提取。
A、基因组DNA检测:OD260/OD280=1.8-2.0,浓度大于0.3μg/ul,杂交需模板DNA约60 μg/泳道/次;
B、请提供基因组DNA检测图片,要求无降解,无蛋白污染;
C、检测样品低温运输至公司。
3、客户如果无法提供高品质的基因组DNA样品,信诺金达可以帮助制备可用于Southern Blot检测的DNA样品,客户提供样品要求如下:
A、菌液:不低于500ul,冰袋或者干冰运输
B、组织:总量不小于2g,干冰运输
C、细胞:提供新鲜的细胞即可,尽量不要使用盐溶液冲洗
4、请注明基因组DNA酶切方案,如果项目中需要用到非常规的限制性内切酶,需额外加收酶切费用或有客户提供相应的限制性内切酶。
端粒检测实验基本流程
1.基因组DNA提取
2.基因组DNA酶切消化
3.DNA限制酶切消化后产物
4.琼脂糖凝胶电泳
5.转膜
6.固定
7. DIG探针标记;
8. Southern杂交;
8. 曝光显色;
9. 提交电子版检测报告,包括详细操作程序和实验结果等。
Southern Blot服务交付文件
信诺金达负责对客户提供样品进行DIG探针标记与Southern杂交检测技术服务,最终提供检测报告及检测图片
1、DNA样品检测报告(实验样品不返还,请注意保留备份)
2、标准实验流程报告
3、southern blot实验结果检测报告
4、如果是实验有额外的要求,请提前致电或邮件说明
实验范例图片:
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